HPLC ADALAH

HPLC ADALAH

Apa itu HPLC?

HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography. Ini adalah teknik kimia analitik yang digunakan untuk memisahkan, mengukur dan mengidentifikasi setiap komponen yang ada dalam campuran. HPLC digunakan di berbagai industri untuk menganalisis berbagai produk dengan memisahkannya ke dalam komponen-komponennya. Teknik pemisahan dijelaskan dalam artikel ini.

Teknik ini tergantung pada pompa untuk mendorong beberapa cairan pelarut yang mengandung campuran sampel melalui kolom yang mengandung bahan penyerap padat.

Setiap komponen dalam sampel akan berinteraksi dengan bahan penyerap dengan cara yang sedikit berbeda. Ini akan menyebabkan laju aliran yang berbeda di berbagai komponen sehingga menyebabkan komponen terpisah saat mereka mengalir keluar dari kolom. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi digunakan terutama untuk keperluan manufaktur, kedokteran dan penelitian.

Dalam pembuatan, HPLC sebagian besar digunakan dalam proses produksi produk biologi dan juga farmasi. Dalam kedokteran, digunakan untuk mendeteksi kadar vitamin D dalam serum darah. Dalam hal penelitian, HPLC digunakan untuk beberapa tujuan. Contoh yang baik adalah; memisahkan komponen dalam sampel biologis, yang sebagian besar kompleks.

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi digunakan dalam memisahkan dan memurnikan senyawa sesuai dengan polaritasnya. Untuk memahami polaritas, kita dapat menggunakan contoh sederhana dari minyak, air dan etanol. Etanol adalah kutub. Dengan demikian akan tercampur dengan baik dengan air. Sebaliknya, minyak tidak polar, sehingga tidak bercampur dengan air.

Mekanisme Pemisahan HPLC dan Komponennya

Kolom HPLC adalah juga disebut fase diam. Itu terbuat dari zat yang berbeda, kebanyakan silika, dan sifatnya sangat kompak. Rantai karbon panjang memfungsikan partikel silika. Rantai karbon bersifat non-polar. Dengan demikian, semakin panjang rantai, semakin non-polar kolom akan menjadi. Kolom C18 adalah yang paling banyak digunakan dan mengandung 18 rantai karbon.

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi dapat digunakan dalam memisahkan senyawa dalam sampel lingkungan, kimia medis, mikrobiologi, dan juga sampel lingkungan. Senyawa disuntikkan ke dalam kolom HPLC. Fase gerak, yang secara praktis merupakan campuran air dan pelarut organik kemudian dimasukkan. Pelarut organik yang digunakan sebagian besar adalah metanol atau asetonitril. Ini disebut fase gerak karena campuran bergerak melalui kolom HPLC dan masih menyiram senyawa dalam kolom pada saat yang bersamaan. Proses flushing out juga dikenal sebagai eluting.

Senyawa sering dielusi bersama gradien konsentrasi. Dalam istilah yang lebih sederhana, jumlah air yang berada dalam fase gerak berkurang setelah beberapa waktu, karena persentase pelarut non-polar meningkat secara serempak. Komponen dalam fase gerak akan menjadi lebih nonpolar. Senyawa yang terkandung dalam sampel yang digunakan akan menempel pada rantai karbon di kolom. Senyawa yang paling non-polar akan menempel kuat sedangkan sebagian besar senyawa polar akan lemah.

Pada dasarnya, Kromatografi Cair Kinerja Tinggi memisahkan komponen dari senyawanya sesuai dengan polaritasnya. HPLC juga digunakan sebagai alat analisis untuk memeriksa sampel lingkungan dan biologis untuk keberadaan atau bahkan tidak adanya senyawa yang diketahui. Senyawa semacam itu termasuk obat-obatan, racun, dan pestisida. Ini juga dapat membantu dalam mengidentifikasi senyawa yang tidak diketahui.

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *